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植物自身產(chǎn)生的,運(yùn)往其他部位后能調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育的微量有機(jī)物質(zhì)稱為植物激素。人工合成的具有植物激素活性的物質(zhì)稱為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,也有稱為外源植物激素。在植物愈傷組織培養(yǎng)中,外源激素起著傳遞遺傳物質(zhì)的脫分化、再分化等發(fā)育信號(hào)的作用。只有合理使用外源激素,才能充分發(fā)揮其調(diào)節(jié)作用,誘導(dǎo)愈傷組織產(chǎn)生和分化。所以了解并掌握外源激素的作用成為培養(yǎng)植物愈傷組織的關(guān)鍵。下面將詳細(xì)介紹外源激素對(duì)愈傷組織各個(gè)培養(yǎng)階段的影響,方便您選擇合適的外源激素。
IAA
一、外源激素對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響
愈傷組織誘導(dǎo)中常用的生長(zhǎng)素有NAA、IAA和2,4-D。萘乙酸NAA和吲哚乙酸IAA對(duì)植物細(xì)胞的毒害作用較輕,產(chǎn)生的愈傷組織易分化,但I(xiàn)AA誘導(dǎo)愈傷組織的效果比NAA稍差。雖然2,4-D誘導(dǎo)愈傷組織較NAA和IAA有效,但濃度過高時(shí)愈傷組織會(huì)喪失分化能力[1]。在愈傷組織誘導(dǎo)階段,添加外源生長(zhǎng)素應(yīng)優(yōu)先考慮采用NAA、IAA,如兩者都不能完成愈傷組織誘導(dǎo)時(shí),再考慮采用2,4-D。
愈傷組織誘導(dǎo)中常用的細(xì)胞分裂素有6-BA、TDZ、KT等。6-BA是最為常用的細(xì)胞分裂素,能促進(jìn)細(xì)胞分裂,有利于愈傷組織的形態(tài)建成;KT對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)率的影響不大,但在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加KT可以改善愈傷組織的質(zhì)量,能延緩愈傷組織的衰老和器官分化能力的喪失;TDZ比同濃度的6-BA和KT誘導(dǎo)效率高。
雖然添加一種外源激素也能誘導(dǎo)愈傷組織但誘導(dǎo)時(shí)間較長(zhǎng)[2],且效果不理想。有研究表明:只用生長(zhǎng)素2,4-D就可成功誘導(dǎo)外植體產(chǎn)生愈傷組織,但在只含有2,4-D的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的愈傷組織比較松軟,呈黏液化和泡狀,一般不易分化,且再生頻率很低[3]。通常誘導(dǎo)愈傷組織需要同時(shí)添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。
二、外源激素對(duì)愈傷組織分化的影響
在誘導(dǎo)愈傷組織分化階段,一般需要配合添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。由于2,4-D對(duì)細(xì)胞有毒害作用,因此當(dāng)使用2,4-D誘導(dǎo)脫分化后,一般應(yīng)降低和去掉2,4-D,否則往往先生根,不能形成芽的形態(tài)分化。誘導(dǎo)愈傷組織分化最常用的生長(zhǎng)素為NAA和IAA。而誘導(dǎo)愈傷組織常用的細(xì)胞分裂素有KT和6-BA,但兩者各有特點(diǎn)。使用6-BA分化芽多、芽密、成叢狀,但苗細(xì)高、瘦弱、木質(zhì)化差;使用KT則芽稀少、往往長(zhǎng)成獨(dú)棵苗,粗壯木質(zhì)化程度高。大多數(shù)情況下需要將6-BA或KT與生長(zhǎng)素結(jié)合使用才能完成形態(tài)建成。TDZ其效果較6-BA至少高出一個(gè)數(shù)量級(jí),可以促進(jìn)植物芽的再生,打破芽的休眠;但TDZ濃度過高,會(huì)阻礙芽生長(zhǎng)。
生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值直接影響根和芽的分化,比值高利于根形成,反之則利于莖芽發(fā)生。
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參考文獻(xiàn):
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[2]朱有光, 奚惕. 外源激素對(duì)龍葵愈傷組織形成和器官發(fā)生的影響[J]. 東北師大學(xué)報(bào):自然科學(xué)版, 1989(4).
[3]李代麗, 康向陽. 植物愈傷組織培養(yǎng)中內(nèi)外源激素效應(yīng)的研究現(xiàn)狀與展望[J]. 生物技術(shù)通訊, 2007(03):191-193.